试管婴儿技术的9大操作流程

　　试管婴儿的操作步骤是什么样的，试管婴儿在操作程序上又有什么样的要求及注意事项?本文从女性控制排卵、卵泡监测、卵子培养、体外受精、胚胎移植及移植后注意事项等9个方面详细解读试管婴儿手术的操作步骤，下面让我们一起来了解试管婴儿操作的全过程吧。

　　1、控制性超排卵

　　由于自然月经周期的长短因人而异，同一患者在不同周期也存在差异，所以不易安排取卵时间，而且自然周期中只有一个优势卵泡可以发育，受精后只能形成一个胚胎，而移植一个胚胎的妊娠率是很低的。所以需要采用控制性超排卵来增强与改善卵巢功能，以达到不受自然周期的限制、获得多个健康卵子的目的，提供多个胚胎移植，并尽可能使黄体发育与子宫内膜功能同步。

　　控制性超排卵：一般是先用促激素使体内FSH和LH降调，再施与激素排卵药物，刺激卵巢中的卵泡成长，依据患者对药物的反应性调整药物使用剂量，患者的年龄及药物的使用剂量不同，所获得的卵子数亦不同。

　　目前促超排卵主要有4种方案：克罗米芬—人绝经后促性腺激素(HMG)—绒毛膜促性腺激素(HCG);

　　HMG—HCG;

　　促卵泡激素(FSH)—HCG;

　　促性腺激素释放激素(GnRH)—HMG—HCG;

　　常规使用的是克罗米芬—HMG—HCG方案。

　　2、监测卵泡

　　为评价卵巢刺激效果与决定取卵时间，须利用阴道B超来监测卵泡大小及卵泡成熟额进程，并配合抽血检查E2值 (雌激素)，调整用药量，当2~3个以上的卵泡直径大于1.8cm，且1.4cm以上的卵泡数与E2值相当，便可注射人绒毛促性腺激素(hCG)，促使卵泡成熟,在注射hCG后34~36小时取卵。

　　自然月经周期中进行排卵前监测：世界上首例试管婴儿成功就是用自然周期监测排卵期排卵的，通过基础体温测定、内分泌测定(血雌二醇值、尿中黄体生成素值)和B超的监测，配合临床观察(宫颈粘液变化等)确定取卵时日。

　　3、取卵及卵子培养

　　女性采卵时间确定后，需进行采卵手术，一般常用的采卵途径有：

　　(1)剖腹直视下穿刺卵泡取卵;

　　(2)经腹腔镜取卵;

　　(3)B超引导下经腹壁、尿道膀胱或阴道穿刺取卵，目前多采用经腹腔镜或B超指引下经阴道取卵，后者尤为方便。

　　B超指引下经阴道取卵法：在局部麻醉条件下，经阴道B超引导，将取卵针穿过女性阴道穹窿，直达卵巢吸取卵子，并立即在显微镜下将卵子移到含胚胎培养液(含卵泡液)的培养皿中，置37 °C的培养箱中培养，培养时间取决于所取卵泡的成熟度，成熟者一般培养2～6小时。

　　4、取精

　　精子取出的时间与取卵的日子应为同一天，取精前男性须洗净双手，用手淫法留取精液，取精所给的小杯是无菌的，取精一定时不要触摸杯缘及杯内。取出的精液将采用上游法或Percoll密度梯度离心法处理。

　　5、体外受精及胚胎体外培养

　　取卵后4~5小时左右时间内，将用洗涤法处理的获取体外能量的精子与卵子放在同一个培养皿中，共同培养15～24小时后，可在解剖显微镜下检查，如看到有两个原核存在于卵母细胞原浆中表示已授精，再继续培养36～42小时，当镜下观察到受精卵已分裂至4～8个细胞时，可考虑作胚胎移植。若精子质量太差，则无法自然受精，将必须以显微注射法强迫受精 (参考卵细胞浆内单精子显微授精)。

　　6、胚胎移植

　　受精卵在体外培养48~72小时可发育到8~16细胞期胚胎，此时依据患者的年龄、曾经代怀孕与否及胚胎的质量，决定移植胚胎的数目，多余的胚胎可冷冻保存。胚胎移植一般不需要进行麻醉。

　　目前胚胎移植多在受精后2~3天进行，一般推迟胚胎移植的时间，则对体外培养的条件要求就越高，但是推迟移植时间更符合妊娠生理，同时也可通过自然筛选淘汰劣质胚胎，可提高妊娠率，降低多胎率。

　　胚胎移植流程：手术时须将阴道及宫颈先用生理盐水清洁再用培养液擦洗，将金属或塑料导管置入颈管内，医生在显微镜下用1.3mm的聚四氟乙烯管从培养液内吸出胚胎细胞加吸0.03～0.05ml 培养液或0.03～0.05ml受试者血清，然后将此管插入宫颈管导管内放至距宫底0.5cm处，送胚胎入宫腔。

　　7、胚胎移植后补充黄体酮

　　胚胎移植后需卧床24小时，限制活动3～4天，同时接受黄体酮治疗，目前我们多采用注射法给予黄体酮支持黄体。

　　8、胚胎移植后第14天验晨尿确定是否妊娠

　　胚胎移植后14天需进行β-GCG测定，可由验尿或抽血确定是否妊娠，如果确定妊娠，则改用hCG继续补充到代怀孕10周，如无妊娠情况，停用黄体酮。移植成功的妊娠属高危妊娠予以监护。

　　9、妊娠后14天，B超检查胎儿数及胚胎着床部位。